EGY48酵母化學(xué)感受態(tài)細胞
簡要描述:
EGY48酵母化學(xué)感受態(tài)細胞是LexA系統(tǒng)酵母雙雜交用實驗菌株,MATα型,能直接轉(zhuǎn)化質(zhì)粒進行蛋白相互作用驗證或雙雜交文庫篩選和構(gòu)建。轉(zhuǎn)化標記為ura3,his3,trp1。報告基因為LEU2。EGY48-LexA酵母雙雜交系統(tǒng)需要三種質(zhì)粒配套使用,分別為pLexA、pB42AD和p8op-LacZ。
產(chǎn)品時間:2024-03-20
EGY48 Chemically Competent Cell
酵母菌化學(xué)感受態(tài)細胞
溫馨提示
見我司(懋康生物)整理的酵母雙雜交(Yeast two-hybrid assay)產(chǎn)品專題。
產(chǎn)品標簽
LexA雙雜交系統(tǒng);EGY48;Y2HGold;pGBKT7;pLexA;Aureobasidin A (AbA);金擔(dān)子素;
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 價格(元) |
EGY48 Chemically Competent Cell 酵母菌化學(xué)感受態(tài)細胞 | MF2358-1000UL | 10×100μl | 290 |
MF2358-5000UL | 50×100μl | 1320 |
產(chǎn)品包裝
組分編號 | 組分名稱 | 保存 | 貨號(規(guī)格) | |
MF2358-1000UL | MF2358-5000UL | |||
MF2358-A | EGY48 Chemically Competent Cell | -80℃ | 10×100μl | 50×100μl |
MF2358-B | pGBKT7 Control Vector (10ng/μl) | -80℃ | 10μl | 10μl |
MF2358-C | Carrier DNA (10μg/μl) | -20℃ | 100μl | 500μl |
MF2358-D | PEG/LiAC Solution | +4℃ | 5ml | 25ml |
產(chǎn)品描述
酵母雙雜交系統(tǒng)是用于體內(nèi)研究蛋白相互作用的一種非常便利的工具,目前采用的有LexA系統(tǒng)和GAL4系統(tǒng)。在LexA系統(tǒng)中,DNA結(jié)合域(DNA- BD)由一個完整的原核蛋白LexA構(gòu)成,轉(zhuǎn)錄激活域(AD)由一個大腸桿菌來源的含88個氨基酸殘基的酸性肽B42構(gòu)成),在酵母中能活化基因的轉(zhuǎn)錄。正常情況,BD和AD不會結(jié)合,將待檢測的蛋白質(zhì)分別與BD和AD融合,形成誘餌融合蛋白(bait-DNA)和誘捕融合蛋白(prey-DNA),只有當(dāng)誘餌和誘捕蛋白發(fā)生相互作用,促使BD和AD的相互接近,才能激活報告基因的轉(zhuǎn)錄。
EGY48是LexA系統(tǒng)酵母雙雜交用實驗菌株,MATα型,能直接轉(zhuǎn)化質(zhì)粒進行蛋白相互作用驗證或雙雜交文庫篩選和構(gòu)建。轉(zhuǎn)化標記為ura3,his3,trp1。報告基因為LEU2。EGY48-LexA酵母雙雜交系統(tǒng)需要三種質(zhì)粒配套使用,分別為pLexA、pB42AD和p8op-LacZ。質(zhì)粒pLexA的篩選標志為HIS3,用于表達誘餌融合蛋白。pB42AD的篩選標志為TRP1,用于表達誘捕融合蛋白。報告質(zhì)粒p8op-LacZ的篩選標志為URA3,報告基因為LacZ,報告基因UAS來源于LexA op (x6),只有當(dāng)誘餌(Bait)和誘捕(Prey)相互作用才能啟動LacZ表達。
本品為經(jīng)特殊工藝制備的EGY48酵母菌化學(xué)感受態(tài)細胞,用pGBKT7質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率>104cfu/μg DNA。且在-80℃能穩(wěn)定保存三個月。
基因型
MATα, ura3, his3, trp1, LexAop (x6)-LEU2
注意事項
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用方法
- 取100 µl冰上融化的EGY48化學(xué)感受態(tài)細胞,依次加入預(yù)冷的目的質(zhì)粒2-5 µg,Carrier DNA (95-100℃ 孵育5 min,快速冰浴。重復(fù)一次。)10 µl,PEG/LiAc 500µl,用槍吹打幾次充分混勻,30℃水浴30 min(在15min時翻轉(zhuǎn)6-8次混勻)。
- 之后將管子放42℃水浴15 min(在7.5min時翻轉(zhuǎn)6-8次混勻)。
- 5000 rpm離心40s棄上清,用400 µl ddH2O重懸沉淀,離心30s棄上清。
- 用50 µl ddH2O重懸,涂板,放入29℃培養(yǎng)48-96 h。
— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務(wù)工作,主要從事細胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白組學(xué)。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。 本公司秉承“以人為本,以誠為信、合同守信”的經(jīng)營理念。堅持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。
EGY48酵母化學(xué)感受態(tài)細胞
EGY48酵母化學(xué)感受態(tài)細胞