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產(chǎn)品中心
BJ5183大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

BJ5183大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

簡要描述:

BJ5183大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞菌株,是一種具較高重組活力的大腸桿菌菌株,提供了轉(zhuǎn)移載體和含腺病毒基因組載體之間發(fā)生重組事件必要的元件,是目前腺病毒系統(tǒng)常用的菌株之一。

產(chǎn)品時間:2024-03-12

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BJ5183 Chemically Competent Cell

大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

產(chǎn)品標(biāo)簽

BJ5183BJ5183-AD-1pAdeasy-1pAdeasy-2腺病毒系統(tǒng);


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貨號

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

價格(元)

MF2318-1000UL

BJ5183 Chemically Competent Cell 大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

10×100μl

400

MF2318-5000UL

BJ5183 Chemically Competent Cell 大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

50×100μl

1720

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產(chǎn)品組分:

組分編號

組分名稱

貨號(規(guī)格)

MF2318-1000UL

MF2318-5000UL

MF2318-A

BJ5183 Chemically Competent Cell

10×100μl

50×100μl

MF2318-B

Control Vector puC19, 10pg/μl

10μl

10μl


菌株描述

BJ5183菌株是一種具較高重組活力的大腸桿菌菌株,提供了轉(zhuǎn)移載體和含腺病毒基因組載體之間發(fā)生重組事件必要的元件,是目前腺病毒系統(tǒng)常用的菌株之一。BJ5183菌株含recBC sbcBC雙重突變,賦予其較強(qiáng)的重組能力,有利于目的基因與腺病毒質(zhì)粒(pAdeasy-1或pAdeasy-2)的重組。另外,BJ5183菌株含endA突變(編碼核酸內(nèi)切酶),這一突變賦予recBC sbcBC突變菌株更高的雙鏈斷裂修復(fù)活性,也有利于重組DNA的穩(wěn)定和高純質(zhì)粒的提取。StrR賦予BJ5183菌株抗性。

BJ5183菌株基因型:endA1 sbcBC recBC galK met thi-1 bioT hsdR (StrR)


產(chǎn)品描述

本品是大腸桿菌BJ5183菌株經(jīng)特殊工藝制作所得的感受態(tài)細(xì)胞,可用于DNA的熱擊轉(zhuǎn)化。經(jīng)pUC19載體檢測轉(zhuǎn)化效率可達(dá)>5×108 cfu/μg DNA且在-80能穩(wěn)定保存幾個月轉(zhuǎn)化效率不發(fā)生改變。


保存與運輸條件:

保存:-80℃保存,個月有效。

運輸:干冰運輸。


注意事項

1) 感受態(tài)細(xì)胞必須用干冰運輸。感受態(tài)細(xì)胞應(yīng)在-80℃保存(避免溫度波動),不可反復(fù)凍融且放置時間過長,否則會減低感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率。

2) 在冰上緩慢融化感受態(tài)細(xì)胞。不可在冰上放置時間過長,否則會降低轉(zhuǎn)化效率。

3) 進(jìn)行轉(zhuǎn)化操作時,需在相應(yīng)溫度及無菌條件下進(jìn)行。

4) 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒可相應(yīng)減少終用于涂板的菌量。

5) 為防止轉(zhuǎn)化實驗不成功,可保留部分連接反應(yīng)液以重新轉(zhuǎn)化,將損失降到低

6) 產(chǎn)品包裝內(nèi)含載體pUC19 DNA(10pg/μl),供對照實驗用。

7) BJ5183菌株的質(zhì)粒產(chǎn)量不高。腺病毒構(gòu)建成功后,可選擇在其它大腸桿菌菌株中擴(kuò)繁和純化質(zhì)粒。

8) 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作

使用方法【所有操作均在無菌條件的標(biāo)準(zhǔn)下進(jìn)行】

1) 從-80冰箱取出取感受態(tài)細(xì)胞,迅速置于冰浴中,5min后待菌塊融化,加入目的質(zhì)粒含有目的基因并且是線性化和腺病毒質(zhì)粒,用手輕彈管底輕輕混勻(避免用槍吹打),冰浴靜置25min。

2) 42水浴熱45s,迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置2min。此過程不要搖動離心管。

3) 向每個離心管中加入700 μl無菌的2YT或LB培養(yǎng)基(不含抗生素),混勻后置于37 搖床,200 rpm振蕩培養(yǎng)60min,目的使質(zhì)粒上相關(guān)的抗性標(biāo)記基因表達(dá),使菌體復(fù)蘇。

低速離心收菌(比如5000rpm,1min),留取100μl左右上清,用槍輕輕吹打重懸菌塊,之后加到含相應(yīng)抗生素2YT或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上,用無菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開,將平板置于室溫(或37)直至液體被吸收,之后倒置放于37過夜培養(yǎng)

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名稱

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10×100μl

MS0021-10G

Chloramphenicol, USP Grade 

10g

MS0018-10G

Ampicillin, Sodium Salt 氨芐鈉

10g

MS0017-5G

Carbenicillin, Disodium Salt 羧芐二鈉鹽

5g

MS0019-10G

Kanamycin Sulfate 硫酸

10g

MS0014-1G

Rifampicin, USP Grade 

1g

MF2001-1G

X-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷

1g

MF2002-1G

IPTG 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷

1g



— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】


上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務(wù)工作,主要從事細(xì)胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白組學(xué)。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。 本公司秉承以人為本,以誠為信、合同守信"的經(jīng)營理念。堅持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。


BJ5183大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

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